正确采集临床微生物标本,直接影响到微生物培养鉴定结果。可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗,为临床科学用药和成功的感染控制提供依据,是正确、合理使用抗菌药物,延缓细菌耐药,减少抗医院感染的第一步,也是最重要的一步。为此应正确采集各种细菌学标本。
血液标本的采集
采集方法
(1)75%酒精清洁局部皮肤。
(2)待皮肤干后,再用2%—2.5%碘酒从穿刺点中心部位开始消*,范围不应小于5cm(直径),且不能用手指触摸消*后的皮肤。
(3)皮肤碘酒干后(约1min),穿刺采集血液,采血量成人5-10ml,婴幼儿1-5ml。
(4)采血后立即在床旁接种培养瓶,并迅速轻摇,充分混匀防止凝固,但又不可剧震以防溶血。
骨髓标本的采集
采集方法
在病灶部位或髂前(后)上脊处严格消*后抽取骨髓1ml,注入血培养瓶内。
静脉导管标本的采集
采集方法
(1)常规导管部位皮肤消*。
(2)无菌方法从病人体内拔出静脉导管,剪下导管尖端5cm,放入无菌瓶中。
(3)立即(15min内)送检,避免标本干燥。
呼吸道
1、痰标本
采集方法
①清晨起床后用凉开水漱口多次,以除去口腔内大量杂菌,用力咳出肺深部的脓痰,置于清洁干燥容器中送检。
②痰量极少者可用45℃3%-10%的氯化钠溶液约25ml雾化。对于咯痰量少的幼儿,可轻轻压迫胸骨上部的气管,当其咯痰后用无菌棉棒采集标本。
③咳嗽无力或昏迷病人,可用吸痰管经鼻腔或口腔经气管腔内吸引痰液送检。
④气管切开者可以深入透气孔中取痰。
⑤可用支气管镜直接在病灶部位采集高浓度的病原菌。
⑥用无菌导管经鼻腔插入气管镜内,缓慢注入无菌蒸馏水5ml,取出导管。留取患者在3h内咳出的痰液,放入无菌容器中送检。
⑦胃内采痰法。无自觉症状的结核病人。有时可把痰误咽入胃内,因而可采用胃内溶物做结核菌培养,其阳性结果比咯痰高10%左右,该方法于晨起空腹时,把灭菌的胃管,从鼻腔送入胃内,用20ml注射器抽取胃液。
2、鼻拭子
(1)用湿的拭子(生理盐水);
(2)需插两个鼻孔;
(3)深入3.3cm左右,转动4-5次;
(4)以上用于诊断金*色葡萄球菌暴发时的鼻带菌者。
3、咽拭子、口腔拭子
采集方法:(到细菌室取专用拭子)
①患者清水漱口后,由检查者将其舌外拉,用棉拭子将咽后壁或悬雍垂的后侧反复擦拭数次;
②化脓性扁桃体炎、口腔念珠菌病时,直接用棉拭子在病灶部位擦拭;
③插入运送培养基中立即送检,防止干燥。
胃肠道
1、粪便
采集方法
选取脓血、黏液粪便2-3g,液体粪便取絮状物1-2ml。盛于灭菌瓶中或蜡纸盒中及时送检。
2、肛拭子
在无法获得粪便的情况下,可用经无菌甘油水或无菌生理盐水湿润的肛拭子插入肛门4-5cm(幼儿2-3cm)处,轻轻旋转擦取直肠表面黏液后取出,置运送培养基中送检。
泌尿道
跟据卫生部《医学感染诊断标准》(试行)通知,泌尿系统临床诊断为:患者出现尿频、尿急、尿痛等尿路刺激症状,或有下腹触痛、肾区叩痛、伴或不伴发热,并具有下列情况之一:
(1)尿检白细胞男性≥5个/高倍视野,女性≥10个/高倍视野,插导尿管患者应结合尿培养;
(2)临床已诊断为泌尿道感染,或抗菌治疗有效而认定的泌尿道感染。
1、中段尿
采集方法
①女性采样前用肥皂水或0.1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴,用手指江阴唇分开排尿,弃其前段尿,不终止排尿,留取中段尿10ml于灭菌容器内。
②男性用肥皂水清洗尿道口,或0.1%的碘伏溶液消*尿道口,灭菌纱布擦干,上翻包皮,弃其前段尿,不终止排尿,留取中段尿10ml于灭菌容器内。
2、膀胱穿刺采集法
避免污染是很困难的,培养结果与病情不符时,或尿厌氧菌培养,或婴幼儿中段尿采集困难时,可以用耻骨上穿刺膀胱内采尿。
3、留置导尿者采集法
拔去闭式引流的集尿袋,弃去导尿管前段尿液,留无污染的膀胱内尿液10ml送检。不可从集尿袋下端留取标本。
脑脊液
采集方法
由临床医师以无菌方法收集脑脊液3-5ml(细菌1ml,真菌2ml抗酸杆菌2ml,病*1ml)盛于无菌试管或小瓶中立即送检。
胆汁
1、十二指肠引流法
在无菌操作下,将十二指肠导管吞咽至十二指肠乳头部(距齿65-70cm)时,收集A液(来自总胆管,为橙*或金*色),随之注入25%硫酸镁溶液40ml,经1-2min后再采取B液(来自胆囊,为棕*绿色),随后收取C液(来自肝胆管,为柠檬色),一般认为B液做细菌培养意义较大。
2、胆囊穿刺法
胆囊造影术时,可同时采取胆汁。
3、手术采取法
由总胆管、胆囊直接穿刺采取胆汁。
以上采集之标本应立即送检,否则置于4℃冰箱内,采集时需小心,避免被唾液、十二指肠液细菌污染。
穿刺液标本
穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液。
采集方法
由临床医师行穿刺术抽取。胸腹水可收集5-10ml,心包液、关节液收集2-5ml,置于无菌含抗凝剂的试管或小瓶中,充分混匀后,立即送检。抗凝剂10%EDTA二钠盐,标本与抗凝剂之比10:1。
脓汁及病灶分泌物
1、伤口
⑴表面伤口拭子采集方法
①仅限于皮肤与皮下组织,包括手术切口、褥疮溃疡、新生儿脐炎、婴儿脓疮病。
②用无菌生理盐水或75%的酒精擦去病灶表面渗液;
③用无菌棉拭子抹去及较深部的脓汁分泌物或组织送检;
④采集褥疮溃疡标本时应采集褥疮边缘的脓性分泌物,拭子放在运送培养基中立即送检,不要采集创口表面的渗液。
2、厌氧伤口拭子
⑴厌氧专用棉棒或玻璃棒触及深部脓汁;
⑵可用注射器抽吸,排去针管内空气将针头插入灭菌橡胶塞内送检;
⑶立即送检,送检过程中必须保持在无氧条件;
⑷不宜做厌氧菌培养的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齿龈拭子、直肠、阴道和宫颈拭子以及回肠、结肠造瘘术的流出物,胃、小肠及大肠内容物等。
3、尿道口分泌物拭子
⑴男性用无菌纱布擦拭和清洗尿道口,然后采取从尿道口溢出的脓性分泌物;
⑵采集前列腺液时,先将尿道、膀胱冲洗,然后从肛门用手指按摩前列腺,促使前列腺液溢出;
⑶女性病人先用灭菌纱布或棉拭子仔细擦拭或清洗尿道口,然后从阴道内诊压迫尿道,使分泌物溢出;
⑷取子宫颈分泌物,先用内窥镜扩张阴道,然后从宫颈口用灭菌棉拭子采取分泌物,尽量避免被阴道宫颈附近正常菌群的污染。
4、蜂窝织炎
⑴用无菌生理盐水或酒精消*皮肤;
⑵用细针在炎症最显著处穿刺吸引;
⑶抽少量灭菌生理盐水在针管内;
⑷注入无菌试管内送检。
5、组织标本
⑴活体组织采取的微量标本,可直接接种在培养基内;
⑵表浅组织可直接用棉拭子擦拭、小刀刮去;
⑶较大组织块的表面可采用烧灼或浸入沸水中5-10s,然后用灭菌剪刀切开,取其中的脓汁;
⑷深部组织标本可经皮肤穿刺或手术切取送检;
⑸组织标本不可用福尔马林固定;
⑹有时也可将沾有脓汁的最内层敷料放入无菌平皿内送检。
眼标本采集
⑴一般细菌,以无菌棉拭子采集眼分泌物,尤其脓性分泌物;
⑵沙眼衣原体,首先擦去眼结膜上面的分泌物,然后用无菌小刀刮取穹窿部及眼结膜上皮细胞,用链霉素处理后备用;
⑶对于刚治疗或药物冲洗过的患者最好12-24h后采集标本;
⑷对于泪囊炎患者可稍加挤压后以无菌棉拭子采集标本。
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