擅长白癜风研究专家 http://disease.39.net/bjzkbdfyy/170630/5503607.html细菌的新陈代谢都是在各种不同酶的催化下进行的，由于不同细菌的酶系统不同，其对营养物质的分解能力亦有差异，代谢产物亦不相同。故可利用生化反应的方法，测定细菌的各种代谢产物，借以区别和鉴定细菌。VP试验微生物检验中常用的生化反应之一。某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。试验方法1）O’Meara氏法：将试验菌接种于通用培养基，于36±1°C培养48h，培养液1ml加O’Meara试剂（加有0.3%肌酸Creatine或肌酸酐Creatinine的40%氢氧化钠水溶液）1ml，摇动试管1~2min，静置于室温或36±1°C恒温箱，若4h内不呈现伊红、即判定为阴性。亦有主张在48~50°C水浴放置2h后判定结果者。2）Barritt氏法：将试验菌接种于通用培养基，于36±1°C培养4天、培养液2.5ml先加入5°Cα萘酚（2-na-phthol）纯酒精溶液0.6ml,再加40%氢氧化钾水溶液0.2ml，摇动2~5min，阳性菌常立即呈现红色，若无红色出现，静置于室温或36±1°C恒温箱，如2h内仍不显现红色、可判定为阴性。3）快速法：将0.5%肌酸溶液2滴放于小试管中、挑取产酸反应的三糖铁琼脂斜面培养物一接种环，乳化接种于其中，加入5%α-萘酚3滴，40%氢氧化钠水溶液2滴，振动后放置5min，判定结果。不产酸的培养物不能使用。临床意义及应用本试验一般用于肠杆菌科各菌属的鉴别。在用于芽胞杆菌和葡萄球菌等其它细菌时，通用培养基中的磷酸盐可阻碍乙酰甲基醇的产生，故应省去或以氯化钠代替。β-半乳糖苷酶试验（ONPG试验）β-半乳糖苷酶试验是以有些细菌可产生β半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)，生成*色的邻硝基酚这样的原理进行的试验方法。试剂0.75MONPG溶液。取80mg溶于15ml蒸馏水中，在加入缓冲液（6.9gNaH2P04溶于45ml蒸馏水中，用30%NaOH调整pH为7.0，再加水至50ml）5ml，置4℃冰箱中保存。0NPG溶液为无色，如出现*色，则不应再用。试验方法从克氏双糖铁培养基上取菌，于0.25ml无菌生理盐水中制成菌悬液，加入一滴甲苯并充分振摇，使酶释放。将试管置37℃水浴5min，加入0.25mlONPG试剂，水浴20min～3h观察结果。结果判读菌悬液呈现*色为阳性反应，一般在20～30min内显色。临床意义及应用迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本实验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。缓发酵乳糖的肠杆菌ONPG实验阳性，如埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属等。不发酵乳糖的细菌如沙门菌属、变形杆菌属等为阴性。本试验可作为迟缓发酵乳糖细菌的快速鉴定方法。 异常结果：埃希氏菌引起肠道外感染，特别是泌尿道感染。 枸橼酸杆菌属引起原发性枸橼酸杆菌肺炎或继发性枸橼酸杆菌肺炎。病理改变主要表现为支气管肺炎，可有肺泡壁破坏形成小脓肿及局灶性出血。 克雷伯菌属引起的呼吸道感染、败血症、化脓性脑膜炎、尿路感染等临床症状。 还有沙门菌属、变形杆菌属等引起的各种异常症状。 需要检查的人群：埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、沙门菌属、变形杆菌属感染的患者。七叶苷水解试验七叶苷水解试验是以有的细菌可将七叶苷分解成葡萄糖和七叶素，七叶素与培养基中枸橼酸铁的二价铁离于反应，生成黑色的化合物，使培养基呈黑色的原理进行的一种细菌鉴别方法。试验方法七叶苷培养基、胆汁七叶苷培养基。将待检菌接种于七叶苷培养基中，培养后观察结果。结果判读培养基变为黑色为阳性，不变色者为阴性。临床意义及应用主要用于D群链球菌与其他链球菌的鉴别，前者阳性，后者阴性。也可用于革兰阴性杆菌及厌氧菌的鉴别。 异常结果： (1)链球菌属所致疾病：致病链球菌引起各种化脓性炎症、猩红热、风湿热等疾病。 A群链球菌所致疾病：化脓性感染：扁桃体炎、丹*、蜂窝织炎、淋巴管炎、败血症、猩红热、风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎。 B群链球菌：条件致病菌，是新生儿败血症和脑膜炎主要致病菌。 肺炎链球菌：引起大叶性肺炎等疾病。 甲型链球菌：条件致病菌，在一定条件下引起亚急性细菌性心内膜炎。 变异链球菌：与龋齿有密切关系。 (2)某些革兰阴性杆菌及厌氧菌引起的感染症状。 需要检查的人群：有链球菌属、某些革兰阴性杆菌及厌氧菌引起的感染症状的病人。
来源：医学检验资讯
编辑：朋
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